Методика
ПРЯМОЕ ДЕНСИТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРОВ (на примере использования кукурузной патоки). Анализ проводится на стеклянных пластинках со слоем силикагеля толщиной 0,5 мм. Пластинки используются сразу после получения. Образцы кукурузной патоки с известным содержанием твердого остатка разбавляют водой до концентрации ~1 % (по этому остатку). С помощью шприца на 25 мкл, снабженного дозатором, полученный раствор наносят на пластинку полосами шириной 6 мм, содержащими от 5 до 90 мкг твердого вещества. Чтобы полосы были узкими, их подсушивают током теплого воздуха. (если образец растворяют в каком-либо органическом растворителе, раствор при подсушивании может «ползти» по внешней стороне иглы шприца, что приводит к потере вещества при нанесении). На каждой пластинке помещается 12 полос: 6 — контрольного сиропа и 6 — анализируемого.
Пластинку проявляют в подходящей системе растворителей при ~25°С; фронт растворителя должен подняться на 12 см от стартовой линии. Мальтоолигосахариды вплоть до декасахарида можно разделить в системе этилацетат—метанол—вода (37:40:23 по объему), однако этот проявитель эффективен лишь для пластинок с силикагелем F-254.
Несколько изменив состав проявителя, его можно применять и с другими сорбентами.
Пластинку высушивают в токе теплого воздуха, опрыскивают 50%-ной серной кислотой и прокаливают при 120 °С для обнаружения пятен. Чтобы полученные результаты были воспроизводимыми, пластинка должна быть равномерно опрыскана мелкими капельками распыляемой жидкости.
Количественную оценку состава смеси проводят методом трансмиссионной денситометрии на денситометре, снабженном самописцем и интегратором для определения площади каждого пика.
Пластинку сканируют в горизонтальном направлении так, что сначала регистрируются все моносахариды, затем дисахариды и т. д. Для определения площадей пиков можно также использовать планиметр. Количество каждого компонента определяют по отношению к соответствующему сахару в стандартном образце путем сравнения площадей пиков. В данном случае необходимость в использовании фильтра к лампе денситометра отсутствует.
При использовании в качестве проявителя смеси (3:4:2 по объему) этилацетат — метанол — вода, которая позволяет получить четкое разделение высших сахаров, рассматриваемый метод обеспечивает высокую точность результатов (табл.4).
Таблица 4. Состав кукурузной патоки
определенный методом бумажной и тонкослойной хроматографии
|
Сахариды, % | |||||||||
|
моно |
ди |
три |
тетра |
пента |
гекса |
гепта |
окта |
нона + высшие | |
|
Обычная патока (43 экв. глюкозы) | |||||||||
|
БХ |
20,5 |
15,4 |
11,3 |
9,8 |
7,7 |
6,0 |
4,7 |
3,9 |
21,5 |
|
ТСХ |
20,1 |
14,6 |
11, |
8,6 |
7,2 |
5,4 |
4,9 |
3,4 |
23,9 |
|
Станд. отклонение для ТСХ |
0,7 |
0,51 |
0,40 |
0,30 |
0,37 |
0,35 |
0,11 |
0,20 |
0,41 |
|
Патока с низким содержанием глюкозы и высоким содержанием мальтозы (43 экв. глюкозы) | |||||||||
|
БХ |
6,8 |
34,4 |
17,2 |
9,4 |
2,3 |
2,6 |
2,4 |
4,0 |
20,0 |
|
ТСХ |
7,3 |
35,1 |
17,5 |
8,5 |
2,5 |
2,4 |
2,0 |
2,8 |
21,6 |
|
Станд. отклонение для ТСХ |
1,25 |
4,36 |
3,10 |
0,66 |
0,70 |
1,10 |
0,77 |
0,65 |
1,33 |
|
Патока с высоким содержанием глюкозы и мальтозы (70 экв. глюкозы) | |||||||||
|
БХ |
41,1 |
41,4 |
3,2 |
4,8 |
3,8 |
1,8 |
2,4 |
- |
1,6 |
|
ТСХ |
40,8 |
42,1 |
3,5 |
3,1 |
2,7 |
1,5 |
2,4 |
- |
3,1 |
|
Станд. отклонение для ТСХ |
1,25 |
1,62 |
1,28 |
0,65 |
0,26 |
0,37 |
0,78 |
- |
0,32 |
Смотрите также
Кальций
Соединения
кальция – известняк, мрамор, гипс (а также известь – продукт известняка) уже в
глубокой древности применялись в строительном деле. Вплоть до конца 18 века
химики считали известь ...
Материальный баланс
Основой материального
баланса является закон сохранения материи, согласно которому количество
материала, поступающего в процесс (приходные статьи материального баланса),
равняется количеству продук ...